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?科技的進步催生更多的需求,隨著我們對生物材料的低溫保存技術要求的日益提高,海藻糖這一低內毒素品質高的藥用輔料應運而生,讓生物材料的低溫保存技術日趨完善!本期跟著AVT小編一起了解下為什么海藻糖可以做到這些?

?小編告訴你:為什么海藻糖更適合作為生物制品凍干保護劑?
?縱觀近年來全球銷售額前十的藥物,單抗類注射液占據了半壁江山,尤其艾伯維的阿達木單抗(修美樂)從2012年到2018年連續蟬聯全球最暢銷藥物,可以說生物制劑市場巨大且前景十分可觀。而在產品開發生產過程中對蛋白的穩定和保護至關重要,這就不得不提到生物制品處方中常用的一款蛋白保護劑-海藻糖。為什么海藻糖更適合作為生物制品保護劑?
?《自然》雜志曾在2000年7月發表了對海藻糖進行評價的專文,文中說到:“對許多生命體而言,海藻糖的有與無,意味著生命或者死亡”。許多對外界惡劣環境表現出非凡抗逆耐受力的物種,都與它們體內存在大量海藻糖有直接的關系。作為凍干保護劑的糖類也很多,比如常用的蔗糖,麥芽糖,甘露醇等,為什么我們經常在實驗中發現使用海藻糖作為凍干保護劑時凍干效果會更好?帶著這個疑問,我們通過文獻調研總結出以下海藻糖與其它糖類相比的優勢:
?1.更強的水合能力
?按每個葡萄糖單位算,海藻糖周圍的不凍水分子數是糖類中最多1,能夠形成剛性更強的海藻糖/水結構2,抗冷凍脫水能力更強。這也是為什么在很多凍干試驗中,海藻糖的表現比蔗糖好。
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? ? ? ? ? ? ? ? ?注:n(e-OH)——每糖分子周圍羥基數? ? ? ?注:/3 ——代表體系脆弱程度
? ? ? ? ? ? ? ? ? n——糖單位數
? ? ? ? ? ? ? ? ? N——每糖分子周圍不凍水分子數
?2.高玻璃化相轉變溫度
?海藻糖具有更高的的玻璃化相轉變溫度(120℃),因此海藻糖溶液更不容易形成冰晶,能夠更好的保護蛋白不受凍干過程的損傷。

?注:分別使用二乙醇胺、葡聚糖、葡萄糖、蔗糖、海藻糖作為保護劑,凍干前后酶活性變化的對比。
?3.抗高溫潮濕能力
?在高溫、潮濕等特殊環境下,海藻糖對蛋白的穩定、保護效果較蔗糖等其它糖類保護劑更好。

? 注:40℃條件下孵育9小時,AH-AP聚合蛋白凍干粉復溶后的含量變化對比。
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?海藻糖讓生物材料的低溫保存技術日趨完善,小伙伴們需要了解一下:
?海藻糖在細胞、器官、胚胎保存中有著怎樣的應用!
?現如今,隨著低溫保存技術的不斷完善,已經實現了諸多生物材料的低溫保存,例如血細胞、干細胞、精子、卵細胞、胚胎、角膜、皮膚、胰島等。血細胞的長期保存解決了臨床上血液供需不平衡的問題;干細胞的保存在治療再生障礙性貧血、白血病中能減少抗宿主病的發生率;生殖細胞的保存對再生醫學和輔助生殖有著重大的意義;動物胚胎保存為挽救瀕危動植物帶來了極大的社會經濟效益;胰島的保存為器官移植帶來了極大的便利。
?海藻糖是低溫保存常用的非滲透性保護劑,這類保護劑分子不能進入細胞,但可以提高胞外溶液的溶質濃度,不僅能在細胞外形成高滲,減少胞內冰的形成,還具有較高的玻璃化溫度,易形成玻璃態,一方面避免了低溫對細胞膜蛋白質和脂質的損傷,另一方面將細胞膜的蛋白質分子支撐包裹起來,使之不易變形,抑制細胞膜融合,降低細胞膜的通透性。
?器官保存
?國外市場上,含海藻糖最有代表性的是日本京都大學研制的肺臟器官保存液,ET-Kyoto及New ET-Kyoto液,在國內已申請專利,原申請人為日本京都大學,后轉至日本大冢制藥,在中國申請的發明專利于2012年授權。
?細胞保存
?目前研究中,應用含不同濃度海藻糖的保護液,對低溫保存肝癌細胞、犬氣管、卵巢癌細胞和宮頸癌細胞及小鼠受精卵,均取得了良好的保存效果。胎牛血清( FBS)也有助于細胞的冷凍保存,且在腸道腫瘤組織原代細胞、牛成纖維細胞等低溫保存中效果顯zhu。
?Zheng等用麥管和石英毛細管作為冷凍載體,使用兩種滲透性保護劑EG和DMSO(體積分數為8%、15%)及一種非滲透性保護劑海藻糖(0.5 M)玻璃化保存了人臍靜脈內皮細胞( HUVECs)。結果表明,用1.4 M EG加1.1 M DMSO,并用石英毛細管玻璃化可以得到90%的存活率。
?胚胎保存
?海藻糖單獨使用或與其它保護劑混合使用,均能對胚胎的保存起到良好的保護效果,Isachenko等使用含有海藻糖的玻璃化溶液保存山羊胚胎,發現保存后的胚胎不論在體內還是體外均能達到較高的生存。
?皮膚保存
?賈曉明等的研究表明,海藻糖作為一種新型的冷凍保護劑,對于皮膚組織的低溫保存具有良好的保護作用。其保護作用不僅體現在細胞骨架,還體現在對皮膚組織a-輔肌動蛋白和p-整合素等的保護。
?艾偉拓為您帶來的海藻糖(海保-99)具有超低內毒素(實測值<0.1IU/g)、無菌的品質高特點,滿足生物制品,血液制品和脂質體等各種高端注射劑開發需求。超高性價比,可顯zhu提高客戶終端產品的競爭優勢。
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